詳解AChRAb試劑盒的具體操作步驟
更新時(shí)間：2023-10-25 點(diǎn)擊次數(shù)：572次
AChR(AcetylcholineReceptor)是神經(jīng)肌肉接頭的重要成分，也是神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿傳遞信號(hào)的主要受體。可以用于研究其他與乙酰膽堿受體相關(guān)的自身免疫性疾病和機(jī)制，如重癥肌無力(MyastheniaGravis)等，對(duì)于相關(guān)疾病的早期診斷、疾病發(fā)展的預(yù)測(cè)和患者治療方案的制定具有重要意義。
AChRAb試劑盒是一種用于檢測(cè)人體中AChR抗體的試劑盒，采用間接熒光免疫法(IIF)進(jìn)行檢測(cè)。該方法基于免疫熒光顯微鏡技術(shù)，通過觀察標(biāo)記抗體與標(biāo)本中的AChR抗體結(jié)合后的熒光信號(hào)強(qiáng)度來判斷AChR抗體的存在與水平。
具體操作步驟如下：
1.標(biāo)本制備：將待測(cè)血清樣本稀釋后滴加到載玻片上，干燥定型。
2.孵育：將載玻片與含有培養(yǎng)基和抗人IgG抗體標(biāo)記的熒光素共價(jià)的二抗混合液滴加，使其充分接觸。在室溫下孵育一段時(shí)間，使AChR抗體與標(biāo)記二抗結(jié)合。
3.洗滌：將載玻片放入含有緩沖液的洗滌盒中，用洗滌液洗滌去除未結(jié)合的二抗。
4.觀察：將洗滌后的載玻片放入熒光顯微鏡中觀察。當(dāng)樣本中存在AChR抗體時(shí)，標(biāo)記二抗與AChR抗體結(jié)合，產(chǎn)生熒光信號(hào)。熒光信號(hào)的強(qiáng)度與AChR抗體的濃度成正比。
AChRAb試劑盒是將待測(cè)血清中的AChR抗體與免疫熒光試劑盒中的抗人IgG抗體標(biāo)記的熒光素共價(jià)的二抗發(fā)生特異性結(jié)合。然后，通過洗滌去除未結(jié)合的二抗，使結(jié)合到載玻片上的AChR抗體-二抗復(fù)合物保留在載玻片上。在熒光顯微鏡下觀察被標(biāo)記的AChR抗體的熒光信號(hào)，根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度判斷AChR抗體的存在與水平。
AChRAb試劑盒的原理簡(jiǎn)單明了，具有高度的敏感性和特異性。通過該試劑盒可以快速準(zhǔn)確地檢測(cè)人體中AChR抗體的水平，用于早期診斷和監(jiān)測(cè)多種自身免疫性疾病，如重癥肌無力和藥物相關(guān)性肌無力等。它在臨床診斷中的應(yīng)用有非常廣泛的前景。
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