人們普遍認為Graves病（GD）是一種自身免疫性疾病，甲亢是由于TSHR刺激性自身抗體引起的[1]。TSHR自身抗體（TRAb）根據不同的方法檢測，可以得到甲狀腺刺激性抗體（TSAb）、TSH結合抑制抗體（TBII）和甲狀腺阻斷性抗體（TSBAb）的結果。
多年來，大多數檢測都是以可溶性豬TSHR為配體，通過促甲狀腺激素結合抑制試驗來完成檢測[2]。隨后，兩種針對TSH結合抑制抗體（TBII）的兩步檢測法被引入，一種是使用豬TSHR的包被板ELISA法（CP檢測），另一種是使用人TSHR的包被管測定（CT檢測）。據報道，這兩種方法的靈敏度和特異性都很高[3,4]。這是第一份比較使用豬TSHR的CP檢測法和使用人TSHR的CT檢測法的報告，兩種方法檢測來自甲狀腺毒癥和橋本甲狀腺炎患者的相同血清樣本。
研究目的
本研究的目的是比較兩種兩步檢測法的性能，一種是使用純化豬促甲狀腺激素受體（豬TSHR）包被板（coated plate，CP）的ELISA檢測法（TRAb ELISA），另一種是使用重組人促甲狀腺激素受體（人TSHR）包被管（coated tube，CT）的放免檢測法。
豬TSHR的CP酶免檢測是據已發表的方法測定的（該方法縮寫為ELISA）[4]。在人TSHR的CT放免檢測（縮寫為CT法）中，根據ROC曲線獲取的陽性抑制率臨界值為20%（靈敏度為99.0%，特異性為98.8%）。TSAb根據已發表的文獻[5]進行檢測，臨界值為180%。TSBAb的正常結果是小于40%。
TgAb和TPOAb用RIA(Cosmic公司，日本)測定，正常值均為小于0.3 U/mL。
檢測對象
患者的樣本在Kamijo甲狀腺診所收集。所有樣本采集后立即凍存，編碼并進行連續檢測（2個重復）。診斷依據的是臨床癥狀，TSH，FT4，FT3，甲狀腺超聲，锝閃爍顯像技術（Tc-99）和其他血清學數據。
檢測對象：100例未經治療的Graves病（GD）患者、30例無痛性甲狀腺炎（PT）患者、10例亞急性甲狀腺炎（SAT）患者和87例橋本甲狀腺炎（HT）患者。
結果
在100例未經治療的GD患者中，除一例外，其他患者血清中的TBII（TRAb）均呈現ELISA和CT放免法雙陽性。
在30例PT患者血清中，1例呈ELISA單項陽性，4例呈CT法單項陽性。在1例ELISA和CT法雙陽性的PT病例中，甲狀腺功能亢進繼發于PT，但其余的PT病例（3例CT法單陽）并未觀測到相關現象。
在10例SAT患者中，有1例CT法陽性，但ELISA為陰性。
在87例HT患者中，9例為ELISA陽性（包含1例單項陽性），10例為CT法陽性（包含2例單項陽性）。
在甲狀腺毒癥鑒別和HT患者的陽性檢出率上，兩種檢測方法的靈敏度和特異性基本一致，因此可以合理得出結論：在臨床應用中，兩種檢測方法的高靈敏度可能來自方法學本身，這可能緣于兩種方法學排除了TSH抗體和異嗜性抗體HAMA的影響，而與使用的促甲狀腺激素受體（TSHR）的種源無關。
圖1顯示了未接受治療的GD患者、PT患者、SAT患者和HT患者血清中ELISA(A)和CT法(B)的值。
在11例TRAb抗體陽性的HT患者中，4例血清樣本缺失，因此我們總結剩余7例患者的臨床資料和血清檢測結果，見表1。這7例患者中，其中5例ELISA陽性。患者血清TgAb和TPOAb均較高或相對較高。同時，7例患者中，6例TSAb陽性，4例TSBAb陽性。7例患者中，6例表現為橋本氏甲亢。
討論
為了比較這兩種檢測方法，在未經治療的GD患者、PT患者、SAT患者和HT患者中，使用了相同的血清樣本進行測定。在未經治療的GD組中使用兩種檢測法測定同一組血清樣品，靈敏度為99%。作者報道[4]，在未經治療的GD組中，與傳統基于豬TSHR的TBII檢測相比，使用豬TSHR的ELISA檢測具有更高的靈敏度，特異性無差異，Costsagllola等[3]在使用人TSHR的CT檢測時也有類似結論報道。事實上，使用商品化檢測產品（TRAb-III，Cosmic公司，東京）對本研究中100例未經治療的GD患者的血清進行檢測，96例呈TBII陽性[4]。
接下來在PT和SAT患者中對比了ELISA和CT法。雖然在本研究中，PT和SAT患者在兩種檢測方法的陽性檢出率差異沒有統計學意義，但在本組患者中CT法比ELISA有更高的陽性傾向。正如本研究和以前的報告中顯示的自身免疫性甲狀腺炎患者那樣，ELISA和CT法的活性在TSAb和TSBAb之間沒有區別[6,7]。
總之，這些發現提示在未經治療的GD組中，新的ELISA和CT檢測方法在臨床應用中的高靈敏度可能源于方法學本身，推測為TSHR包被板或包被管排除了抗TSH抗體和異嗜性抗體HAMA對檢測系統的影響。Feldt-Rasmussen等[8]曾報道過，傳統的TBII檢測并不能預測個體患者的緩解或復發，但現在用上述兩種檢測方法（ELISA和CT檢測方法）可以對個體患者的緩解或復發趨勢進行重新評估。
參考文獻：Kamijo K. TSH-receptor antibody measurement in patients with various thyrotoxicosis and Hashimoto's thyroiditis: a comparison of two two-step assays, coated plate ELISA using porcine TSH-receptor and coated tube radioassay using human recombinant TSH-receptor. Endocr J. 2003 Feb;50(1):113-6. doi: 10.1507/endocrj.50.113. PMID: 12733717.
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